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高效液相色譜法在臨床實驗室中對不同體液中生物標(biāo)志物的分離和定量起了重要作用。HPLC與其他常規(guī)檢測器(例如UV,熒光和電化學(xué)檢測器)相比,更趨向于質(zhì)量敏感檢測。填充材料技術(shù)的進(jìn)步,例如亞微米表面多孔二氧化硅顆粒已經(jīng)被引入了超高壓液相色譜中,在不遇到高背壓的情況下提高了分離效率。
高效液相色譜儀的系統(tǒng)壓力較高,色譜柱是產(chǎn)生系統(tǒng)壓力的主要部件,高背壓會影響很多方面比如反壓太高超過流通池的耐受壓力,會導(dǎo)致流通池的損壞。恒譜生液相色譜柱均一的粒徑保證了流動相穩(wěn)定的流動,并且確保色譜柱有著較低的柱壓。
恒譜生分析保護(hù)柱也具有低背壓,不漏液,死體積少等優(yōu)點,能夠減少液相色譜系統(tǒng)內(nèi)的部分壓力。
除此之外,其他先進(jìn)技術(shù)的引用與結(jié)合,在不同程度上優(yōu)化了液相色譜分析工作方法,例如高效的自動進(jìn)樣器,減少檢測器的細(xì)胞體積以及數(shù)據(jù)收集和分析的改進(jìn)等等。很多實驗室每天需要生成數(shù)百個樣本的多個參數(shù)的報告,這些方法都能節(jié)約工作時間與提升工作效率。
臨床實驗室通常處理數(shù)百種生物流體樣本,例如血液,尿液和其他體液。需要有效的提取過程與快速分析相結(jié)合,才能快速處理如此繁重的工作,但又不影響分析的質(zhì)量,患者的治療方法與報告的準(zhǔn)確性有很大關(guān)系,因此快又準(zhǔn)的報告是重中之重。
本文簡要討論了臨床實驗室中一些常見的HPLC分析應(yīng)用。
生物樣品需要事先處理和加工,以消除來自其他成分的干擾,尤其是在血液等液體的情況下。采用溶劑萃取,超濾和固相萃取等方式可防止對檢測產(chǎn)生干擾并且可防止色譜柱內(nèi)部堵塞。預(yù)防色譜柱堵塞還可以借助一些液相分析耗材配件的幫助,比如在色譜柱前添加預(yù)柱(保護(hù)柱)起到過濾顆粒物,化學(xué)物,雜質(zhì)等作用。這些污染物會污染色譜柱、堵塞色譜柱,恒譜生建議在色譜柱前安裝分析保護(hù)柱可以起保護(hù)色譜柱、防止堵塞、延長色譜柱的壽命等作用。
除了安裝保護(hù)柱,還可以安裝在線過濾器來防止色譜柱堵塞,恒譜生在線過濾器由潔凈的高品質(zhì)不銹鋼部件組成,這些過濾器旨在減少色譜柱入口篩板的污染和堵塞問題。
兒茶酚胺
兒茶酚胺是一種含有兒茶酚和胺基的神經(jīng)類物質(zhì)。兒茶酚胺充當(dāng)神經(jīng)遞質(zhì)和腎上腺激素。去甲腎上腺素,腎上腺素和多巴胺是可用于診斷是否患有帕金森氏病,高血壓和肌營養(yǎng)不良。以前依靠使用電化學(xué)或熒光檢測法檢測尿液或血漿樣品中的兒茶酚胺含量,而使用HPLC檢測是一種便捷的新分析方法。
維他命
維他命在人體生長、代謝、發(fā)育過程中發(fā)揮著重要的作用。維他命在體內(nèi)是微量的,在除去存在于體液(例如血液和腦脊髓液)中的干擾化合物后,HPLC提供了靈敏且可靠的維他命估算技術(shù)。雖然這樣分析技術(shù)的成本十分高昂,但是由于具有超高靈敏度和快速處理繁重工作量的優(yōu)勢,一些大型臨床實驗室還是會采用這種技術(shù)。
糖尿病監(jiān)測
糖尿病是以高血糖為特征的代謝性疾病。高血糖則是由于胰島素分泌缺陷或其生物作用受損,或兩者兼有引起。HPLC能準(zhǔn)確定量地評估糖化血紅蛋白被證明是有效控制血糖的監(jiān)測技術(shù)。即使在收集樣本兩周后,也可以通過HPLC分析血紅蛋白HbA1c在專用紙上收集并干燥的血斑。該方法為患者長期血糖控制提供了高靈敏度的檢測。