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高效液相色譜廣泛應(yīng)用于各種領(lǐng)域的樣品分析測定,其中C18反相色譜柱可以分析絕大多數(shù)的化合物,是一款常用且入門的色譜柱。柱子在使用中,日常的維護和活化該如何去做呢?恒譜生帶大家了解!
uHPLCs恒譜生建議在使用一款新的液相色譜柱前,最好進行柱性能試驗,記錄試驗條件和結(jié)果,作為今后評價柱性能變化的參考。柱效對于色譜柱是一個非常重要的考慮因素,想要分析結(jié)果好就一定要好好保養(yǎng)色譜柱,維護它的高柱效。測試時要注意:你的測試環(huán)境與條件應(yīng)該按照色譜柱出廠報告中的條件進行,這樣測得的結(jié)果才有可比性。
分析樣品前要對色譜柱進行平衡,等到基線平穩(wěn)后再進樣分析,一般花30分鐘用流動相平衡就可以了。 新液相色譜柱使用前根據(jù)自己柱子的特性選擇合適的試劑將柱子中保存試劑清洗出來,特別需要注意清洗用的溶劑與保存的溶劑相溶性。
日常使用完色譜柱后,一定要注意清洗!實驗分析時如果使用含鹽的流動相,結(jié)束后需要用含10%的甲醇的流動相沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中殘留的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。特別注意:不能用純水沖洗柱子,防止將填料沖塌陷。
新買的液相色譜柱需要活化,不同的柱子活化的方法也不同。舉例常用的c18色譜柱活化可以用0.5ml/min流速的甲醇沖洗2小時以上。柱子內(nèi)有保存液,用甲醇沖洗掉柱中可能殘留的其他雜質(zhì),以免影響后續(xù)分析工作?;罨暮锰幱泻芏?,能排除有機相揮發(fā)所產(chǎn)生的起泡。C18柱是鍵合了c18的,用甲醇沖活化c18柱能使鍵合更好的排列,更有利于分析測定。柱子在活化時最好不要接檢測器,這樣可以避免不必要的化學(xué)污染。
hplc色譜柱是比較昂貴的色譜耗材,想要長久的使用下去,日常就需要注意保養(yǎng)。想要延長色譜柱使用壽命,可以選擇色譜保護柱,過濾掉系統(tǒng)內(nèi)部和樣品殘留的污染物。大多數(shù)的反相色譜柱有自己的ph使用范圍,像恒譜生ods反相色譜柱ph范圍在2-8之間,盡量不要超過這個范圍去使用,避免對柱子造成損傷。