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液相色譜儀除了日常維護(hù)保養(yǎng)外,使用高純度溶劑不僅能保護(hù)液相系統(tǒng),也能增加結(jié)果的可靠性。HPLC級(jí)表示化學(xué)試劑的純度,是可在高效液相色譜中使用的試劑的純度,制備色譜法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC級(jí)試劑。
樣品在注入液相系統(tǒng)前,必須選擇一種合適的HPLC溶劑。在反相高效液相色譜中,當(dāng)樣品溶劑與流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度有差異,尤其是前者的洗脫強(qiáng)度較強(qiáng)時(shí),就會(huì)產(chǎn)生峰的變形及柱效的降低。解決該問題有效的方法是使用流動(dòng)相作為溶劑溶解樣品,這樣既可以避免樣品溶劑和流動(dòng)相之間任何強(qiáng)度或粘度的不匹配,也可以減少樣品分析時(shí)基線的漂移。溶劑在流動(dòng)相中起著重要的作用,并有助于將進(jìn)樣品通過分離柱后輸送到檢測器。為了滿足不同的分析要求,可以購買不同純度等級(jí)的溶劑來使用,HPLC分析需要使用高純度的溶劑,但是同時(shí)也要考慮成本和實(shí)用性等方面。
HPLC級(jí)溶劑的純度通常超過99.9%,并且瓶身標(biāo)簽上還會(huì)標(biāo)明其他雜質(zhì)的含量。但是雜質(zhì)會(huì)導(dǎo)致多余的峰,從而干擾色譜圖中的主峰,對(duì)我們的分析結(jié)果產(chǎn)生干擾。雜質(zhì)產(chǎn)生的原因有很多,可能溶劑純度不夠,可能是瓶身不干凈或者軟管不干凈,還可能是溶劑吸濾頭的過濾雜質(zhì)效果不好。恒譜生不銹鋼流動(dòng)相進(jìn)樣口過濾器能安全有效地保護(hù)泵和止回閥,尺寸小,適用于各種品牌的HPLC系統(tǒng)和多種小瓶口的存儲(chǔ)池容器。吸濾阻力較小,幾乎沒有背壓和形成空化,兼容多種流動(dòng)相管路,無需換吸濾頭即可配不同規(guī)格的吸管,過濾微粒污染物效果好,無氣泡,溶劑利用率高。
在整個(gè)紫外線可見波長范圍內(nèi),沒有溶劑是100%透明的,常用的HPLC溶劑在一定波長范圍內(nèi)顯示出透明性。大多數(shù)應(yīng)用中會(huì)使用紫外線檢測器,因此所選的溶劑應(yīng)該盡可能具有低的紫外線截止波長,讓大多數(shù)的樣品組分在高于截止值的波長處顯示出可測量的吸收度。除此之外,溶劑的粘度越高,填充柱中固定相的阻力將導(dǎo)致背壓越高,因此所選溶劑也應(yīng)具有低粘度才是比較理想的。
大多數(shù)的溶劑在密封瓶中才能維持它的穩(wěn)定性,但某些溶劑的保存期限有限。使用時(shí)要注意查看使用期,注意在有效期內(nèi)使用,不要購買過多的溶劑避免后用不完產(chǎn)生了浪費(fèi)行為。
作為后的建議,所有溶劑在使用前通過進(jìn)樣口過濾器過濾并脫氣,這樣的預(yù)防措施將提高HPLC系統(tǒng)的使用壽命,也有助于增加分析結(jié)果的可靠性。