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泄漏是 HPLC 分析中的常見問題。為了最大限度地減少系統(tǒng)中的泄漏,請盡量選擇相同制造商的硬件。如果安裝不兼容的接頭,分離過程中可能會出現(xiàn)問題,重復連接可能最終導致接頭泄漏。如果需要更換,請使用適當?shù)倪m配器并在實驗之前檢查所有連接是否泄漏。
色譜柱篩板堵塞是另一個常見的 HPLC 故障問題,想要從一開始就盡量減少此問題,請使用柱前過濾器和色譜保護柱。恒譜生的液相在線過濾器和保護柱預柱能夠過濾掉流動相中的污染物,保護色譜柱免受樣品溶液中析出沉淀物的危害。
平時要清潔進樣口,首先斷開并反轉色譜柱,將其連接到泵(但不連接到檢測器),并以兩倍標準流速向泵送溶劑。大約 5-10 柱體積的溶劑應該足以去除入口篩板上的少量顆粒材料。最后使用標準測試混合物評估清洗過的色譜柱的性能。
恒譜生建議定期更換色譜柱篩板。有時溶劑沖洗和恢復程序都不能恢復色譜柱的性能。如果您已經將色譜柱確定為問題源,并且其他色譜柱的修復程序失敗,那可能存在填料中的空隙或入口篩板阻塞。作為最后的手段,打開色譜柱的入口端。注意:打開入口端,尤其是打開出口端,可能會損壞填料床。在打開色譜柱之前,請查閱制造商的文獻。
高效液相色譜故障排除。斷開色譜柱與系統(tǒng)的連接。為防止填料從色譜柱中滲出,請盡快執(zhí)行后續(xù)步驟。使用虎鉗和扳手,或兩個扳手,小心地拆下入口端接頭。如果熔塊留在接頭中,通過在硬表面上敲擊接頭將其移出。如果篩板留在柱子上,請將其滑下而不是提起。這將有助于保持填料床的完整性。
如果是模塊化色譜柱可能需要特殊工具來移除篩板蓋。檢查舊熔塊。將篩板壓在不銹鋼管上會在正確安裝的篩板的柱側邊緣周圍留下一個環(huán)。沒有環(huán)可能意味著套圈太靠近管端。由此產生的松散連接可能會泄漏二氧化硅或充當混合室。檢查填料床。如果它凹陷或斷裂,則需要一個新柱。更換濾芯。更換末端接頭。用手擰緊,然后用扳手擰緊 1/4 圈。