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使用HPLC純化綠茶中的多酚

更新時(shí)間:2022-07-23      點(diǎn)擊次數(shù):1197

      綠茶被廣泛認(rèn)為是地球上最健康的飲料之一。縱觀歷史,綠茶一直被用作治療多種疾病的民間療法,今天它繼續(xù)被提倡作為補(bǔ)充和替代藥物,雖然它一直備受爭(zhēng)議?,F(xiàn)代研究并沒(méi)有消除這些長(zhǎng)期存在的假設(shè),而是讓人們相信綠茶相關(guān)的健康益處。

       綠茶的藥用特性源自茶樹(shù)種,廣泛歸因于該植物的高酚含量。使用高效液相色譜法 (HPLC) 進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn),在干葉和芽中含有豐富的多酚,這些天然植物化合物構(gòu)成了一系列代謝組(兒茶素、類(lèi)黃酮、單寧等),但廣泛的 HPLC 分析突出了一種代謝物,特別是在涉及綠茶對(duì)人類(lèi)健康益處的問(wèn)題時(shí)。

       一、用 HPLC 測(cè)量多酚含量:

       茶多酚是綠茶的主要代謝物之一。盡管多酚的作用機(jī)制仍不清楚,但 EGCG 越來(lái)越多的與降低膽固醇有關(guān),并被認(rèn)為具有抗生素和抗癌特性。然而,它的功效仍有待商榷,因?yàn)?EGCG 在生理?xiàng)l件下表現(xiàn)出較差的穩(wěn)定性和低吸收率 – 占新鮮葉子質(zhì)量的不到 25%。

       雖然富含多種多酚,但相對(duì)較低的 EGCG 濃度尤其推動(dòng)了對(duì)高純度提取物的需求,消費(fèi)者可以將其用作補(bǔ)充劑和補(bǔ)充治療,并具有一系列據(jù)稱的健康益處。制備型 HPLC 已證明有助于滿足對(duì)基于高純度 EGCG 提取物的優(yōu)質(zhì)膳食補(bǔ)充劑不斷增長(zhǎng)的需求。

反相色譜柱-DSC_9326

       二、測(cè)定成分:

       通過(guò)質(zhì)量觸發(fā)分離法從綠茶中純化表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯和其他相關(guān)多酚。使用制備HPLC系統(tǒng),使用質(zhì)量觸發(fā)分餾,在短時(shí)間內(nèi)將該目標(biāo)分子與其他三種多酚化合物分離。該技術(shù)將分?jǐn)?shù)減少到最小。

        兒茶素是多酚代謝產(chǎn)物,可以作為膳食補(bǔ)充劑購(gòu)買(mǎi),但在植物中也是如此。這些分子來(lái)自黃酮類(lèi),綠茶中含量高。由于其抗氧化性能,我們提出了一種簡(jiǎn)單省時(shí)的方法。

       三、材料和方法:

       采用恒譜生C18柱 150 x 20 mm,是用于 HPLC 和 UHPLC 的經(jīng)典反相色譜柱。最常以反相模式使用的固定相。C18 硅膠柱可帶或不帶封端。典型的封端相比未封端的相更具疏水性和非極性。

c18柱-DSC_9324

        非常適用于反相模式下的酸性、堿性和中性分析物,例如:

磺胺類(lèi)藥物

合成代謝類(lèi)固醇

抗精神病藥

Β 受體阻斷藥

酚類(lèi)

防腐劑

       方法使用液相系統(tǒng)以18.9 ml/min的流速運(yùn)行50 min,得到一個(gè)階躍梯度,即降低成分:0 min 10%B,40 min 10%B,40.1用于從綠茶中分離多酚。15%B,50分鐘15%B,0。1%甲酸溶于水(A)和乙腈(B)作為洗脫液。將制備型HPLC系統(tǒng)的波長(zhǎng)設(shè)置為220 nm,數(shù)據(jù)速率為10 Hz。表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子兒茶素的大規(guī)模定向純化。