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液相色譜法是一種廣泛應(yīng)用于制藥行業(yè)的分析分離技術(shù),制藥行業(yè)現(xiàn)在幾乎*將 HPLC 用作色譜技術(shù)。因為它可以進行高效分離分析,提供所需的精確結(jié)果,可用于在生產(chǎn)過程中定量和定性分析成品藥及其成分。這是通過混合物中成分的分離、量化和鑒定來實現(xiàn)的,可用于揭示藥物的特性并監(jiān)測疾病治療的進展。
該技術(shù)的工作原理是混合物中的成分被不同程度地吸引到固定相的吸附劑表面,這取決于它們各自的極性和結(jié)構(gòu)特征;對固定相具有更高親和力的組分將比對流動相具有更高親和力的組分更慢地沿色譜柱向下遷移。
HPLC的主要優(yōu)點之一是它能夠闡明結(jié)構(gòu)并確定藥物制劑中雜質(zhì)的數(shù)量。HPLC特別適用于不易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定和高分子量的化合物。因此,它可以量化藥物的純度和劑型。制藥工業(yè)中使用的其他形式的HPLC包括反相、變性和固定化酶反應(yīng)器 (IMER) HPLC。但是HPLC的缺點之一就是必須先進行校準測試,這會增加成本。高效液相色譜法簡單、特異、快速、精密和準確,可成功有效地用于散裝和藥物劑型的常規(guī)質(zhì)量控制分析。它也可以與其他分析方法結(jié)合使用,以進一步闡明混合物的成分。
HPLC-UV使用UV作為一種檢測形式。它的好處是不需要通過與傳統(tǒng)色譜方法相關(guān)的復(fù)雜處理和程序,使其更省時且經(jīng)濟。對于成分的檢測,二極管陣列和快速掃描檢測器可用于峰識別和峰純度監(jiān)測。相反,熒光和電化學檢測器對合適的分析物更敏感,對許多化合物的選擇性也比紫外檢測器更高。
在液相色譜分離過種程中,特別是在梯度洗脫過程中容易產(chǎn)生莫名其妙的色譜峰,我們俗稱鬼峰,鬼峰的來源有很多,其中主要來源于流動相和管路,如:有機相中污染物,水相中污染物,緩沖鹽,流動相瓶和混合過程產(chǎn)生等等。
鬼峰捕集小柱主要的特點是能夠去除溶劑包括有機溶劑中的雜質(zhì)。反相色譜梯度分析時,將小柱安裝在梯度混合器和自動進樣器之間,不僅能夠去除流動相中的雜質(zhì),還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì)。
HPLC可以結(jié)合的另一種技術(shù)是質(zhì)譜法 (HPLC/MS)。色譜儀通過接口連接到質(zhì)譜儀,這種分析形式可以檢測范圍較廣泛的樣品,包括熱不穩(wěn)定、高極性或具有高分子量的成分。從色譜柱洗脫的組分被引入到專用接口上的質(zhì)譜儀。用于 HPLC/MS 的兩個最常見的接口是電噴霧電離和大氣壓化學電離接口。
液相色譜法是一種高效有用的分析手段,可用于確定藥物配方的成分,使研究人員能夠量化配方并發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品中是否存在任何雜質(zhì)。HPLC 可以與其他技術(shù)相結(jié)合,能夠進一步提高功能,使其成為制藥公司確保藥物高質(zhì)量的理想分析技術(shù)。
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