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HPLC溶劑選擇中的關(guān)鍵考慮因素

更新時間:2021-11-30      點擊次數(shù):1544

選擇用作HPLC分析流動相的溶劑是色譜分析過程的關(guān)鍵步驟。到現(xiàn)在為止,沒有一種能夠滿足所有分析需求的通用溶劑,而且根據(jù)分析要求所使用的溶劑組合會變得更多。選擇合適的溶劑是根據(jù)其物理性質(zhì)以及與樣品、色譜柱固定相的相容性。

流動相溶劑選擇的一般要求是:溶劑應當是高純度,溶劑與固定相不互溶,并能保持色譜柱的穩(wěn)定性,建議使用純水或者液相色譜專用的溶劑;溶劑的性能與使用的檢測器應當匹配;溶劑對樣品應有足夠的溶解能力,樣品要*溶于流動相。如果有不溶的樣品將導致流動相分離或懸浮,會導致后續(xù)一系列的操作問題;溶劑應具有低的粘度和適當?shù)偷姆悬c;盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑。

除此之外本文還討論了選擇合適的流動相溶劑的一些其他重要的考慮因素。

成本

成本是一個重要的考慮因素,因為HPLC需要高純度等級的溶劑,特別在大型實驗室中經(jīng)??吹綌?shù)十個HPLC系統(tǒng)全天候運行。這意味著每天會大量消耗高純度的溶劑,因此成本方面的考慮至關(guān)重要。想要既符合實驗要求又價格比較實惠的溶劑,很多時候都不能同時滿足。如果這個時候溶劑還沒有充分使用,造成浪費,就更得不償失了。

恒譜生2μ,5μ,10μ,20μm入口溶劑過濾器吸濾頭,不會將空氣引入系統(tǒng),無氣泡進入流動相管路,儲液瓶溶劑抽取利用率可達99%以上,大大減少瓶底溶劑因無法凈真空吸取而造成的浪費。

恒譜生溶劑吸濾頭.png

 

吸光度

通常,HPLC中使用的檢測器基于樣品成分對光的吸收。在選定的波長范圍內(nèi),流動相成分的固有吸光度不能干擾樣品的吸光度。理想情況下,流動相溶劑在目標波長范圍下沒有吸收光線是好的。

揮發(fā)性

流動相溶劑應具有低揮發(fā)性。高揮發(fā)性溶劑可能導致流動相組成在使用和存儲過程中發(fā)生變化,這會導致色譜圖的重現(xiàn)性很差。

    黏度

所選的溶劑應具有低粘度讓流過色譜柱的流體不會產(chǎn)生高背壓。色譜柱背壓形成的原因有很多,樣品的易吸附機制也可能會和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導致色譜柱背壓升高。如果有顆粒物堵塞柱頭也會導致色譜柱背壓升高。為了防止色譜柱背壓升高,我們可以選擇在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器,在線溶劑過濾器安裝在液相泵和進樣器之間,能夠去除溶劑中的顆粒物,避免它們進入進樣器,從而防止堵塞。HPLC技術(shù)對到達檢測器的流動相的組成非常敏感,因此必須通過在線過濾器除去溶劑里的固體懸浮液。脫氣也是去除任何少量溶解空氣的必要條件,否則會導致流量限制或雜散峰。

恒譜生不銹鋼在線過濾器安裝在泵的出口和進樣閥之間,采用濾杯式結(jié)構(gòu)受液面積大,使用壽命長,既可有效的防止顆粒進入系統(tǒng),又能保證足夠的液流。恒譜生液相超高壓在線過濾器色譜耗材配件抗腐蝕性好;清洗或更換簡便;不易堵塞,壽命產(chǎn)品;死體積少,不漏液,低背壓,有多種規(guī)格可供選擇。

 

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惰性

所選溶劑應對樣品組分,色譜柱填充物和色譜柱材料呈惰性。如果與這些成分中任何一種有反應性都可能導致形成沉淀物,氣體或其他反應產(chǎn)物,從而破壞系統(tǒng)性能。溶劑與樣品接觸后不應形成單獨的相。換句話說,應該與溶劑*混溶。

恒譜生科學儀器有限公司是致力于研發(fā)制造高質(zhì)量色譜耗材配附件的高科技生產(chǎn)廠家,我們在無氣泡較高凈化能力的溶劑進樣過濾器、超高壓在線過濾器、較少死體積色譜保護柱與卡套、0.1微米高光潔度色譜柱柱管、鬼峰去除柱、管路接頭等領(lǐng)域具有十多年豐富的生產(chǎn)經(jīng)驗和較強大的制造技術(shù)能力。