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高效液相色譜法中,對(duì)色譜圖分析是很重要的。你可以將色譜圖看成一個(gè)橫縱坐標(biāo)為時(shí)間與數(shù)據(jù)的二維圖。固定相則是像海綿一樣的柱子,里面很多孔洞讓樣品流動(dòng),由于每個(gè)樣品物質(zhì)的吸附能力不同,在色譜圖中會(huì)有不同的峰形。
保留時(shí)間是樣品通過高效液相色譜柱所需要的時(shí)間,你在使用相同的流動(dòng)相和色譜柱分析同一樣品時(shí),出現(xiàn)的保留時(shí)間應(yīng)該是固定的。如果保留時(shí)間不同可能是里面有雜質(zhì)造成影響。
在液相色譜分離過程中,容易出現(xiàn)色譜圖中未出峰、一個(gè)或者多個(gè)峰是負(fù)峰、寬峰、雙峰、拖尾峰等問題,我們稱之為鬼峰。鬼峰來源復(fù)雜且多樣,主要來源于流動(dòng)相中殘留的污染物,緩沖鹽等等。恒譜生鬼峰捕集柱對(duì)弱極性和非極性的有機(jī)雜質(zhì)有強(qiáng)烈吸附作用,可以有效消除污染物,避免鬼峰出現(xiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)造成干擾,大幅度縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,從而提高工作效率,還能延長分析色譜柱和儀器壽命。
如果發(fā)生進(jìn)樣量與峰面積不是線性關(guān)系的問題,那十之八九是樣品在流動(dòng)相中的溶解度小,導(dǎo)致有一部分部分樣品被流動(dòng)相沖入色譜柱中,沉積在柱入口端。
總之,實(shí)驗(yàn)影響的因素是復(fù)雜且多樣的,做好一些預(yù)先準(zhǔn)備工作能夠預(yù)防一些問題的發(fā)生。比如在液相柱前添加一個(gè)色譜保護(hù)柱,能夠過濾攔截樣品中的污染物或者系統(tǒng)內(nèi)的金屬離子,能夠有效避免峰型異常或者柱效不佳,影響液相色譜柱的使用壽命。