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將色譜柱保持在最佳狀態(tài)將大大有助于改進(jìn)和標(biāo)準(zhǔn)化您的分離操作,同時確保色譜柱的使用壽命。您可以采取以下措施來實現(xiàn)這一目標(biāo)。
一、注意清潔。如果您從一開始就注意并定期清潔,那么色譜柱 的使用壽命會更長。清潔色譜柱所需的溶劑、酸或堿的類型取決于它們的設(shè)計和吸附劑的具體類型。雖然有些色譜柱需要使用氫氧化鈉,但該溶液會損壞其他色譜柱中的吸附劑。請按照色譜柱的說明書進(jìn)行操作。
二、儲存條件也很重要。很多人沒有考慮如何存儲液相色譜柱,細(xì)菌會在緩沖液的中性環(huán)境中成長。通過水流過色譜柱來防止細(xì)菌生長,然后將色譜柱放入抑菌溶液中,例如含有 20% 乙醇的溶液中,并放入4℃到 8℃的冰箱中。
三、恒譜生建議您在第一次使用色譜柱時注意其背壓。如果背壓隨著時間的推移而上升,則說明您清潔得不夠充分。
四、先過濾。如果您將異物顆粒和污染物拒之門外,可以讓色譜柱保持更長時間的原始狀態(tài)。某些過濾步驟可以去除顆粒延長分析柱的使用壽命。將樣品注入到更昂貴的分析柱本身之前,先通過色譜保護(hù)柱過濾。這樣做不僅可以保持分析柱清潔,還可以濃縮樣品,這意味著您可以使用更多的樣品,從而獲得更好的靈敏度。
五、恒譜生色譜保護(hù)柱作為過濾器或捕集柱,能夠截留微粒和其他污染物。雖然這會額外增加一些成本,預(yù)算會受到影響。但是這對損壞色譜柱造成的損失可以說不值一提。分析保護(hù)柱作用為預(yù)先攔截將被色譜柱牢固吸附,不能被流動相所洗滌的物質(zhì)。分析保護(hù)柱的填料通常使用與色譜柱相同之物,這是由于分析柱的損傷在多數(shù)場合只是分析柱入口側(cè)的一小部分填料。恒譜生建議您可以有效地利用分析保護(hù)柱,以延長色譜柱的壽命。
六、無論您的研究預(yù)算是大是小,當(dāng)您選擇適合您的蛋白質(zhì)樣品和目標(biāo)的規(guī)格的色譜柱(預(yù)裝的或自制的)時,您的蛋白質(zhì)分離將有最大的成功機(jī)會。在此過程中處理所有細(xì)節(jié),包括保養(yǎng)和清潔您的hplc色譜柱,將支持您實現(xiàn)重要發(fā)現(xiàn)的使命。