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相信很多開發(fā)HPLC方法的實(shí)驗(yàn)研發(fā)人員都開發(fā)出了無(wú)法分離混合物重要成分的方法,其方法可以是調(diào)整流動(dòng)相、固定相或柱溫,另一種有效的方法是改變色譜柱粒徑。粒徑較小的液相色譜柱產(chǎn)生較高的塔板數(shù)以獲得更尖銳的峰,并且能夠分離緊密洗脫的峰。一些高分子量化合物在小孔徑填料上可能無(wú)法分離,但在用大孔徑填料填充的色譜柱上很容易分離。通常解決緊密或共洗脫峰的有效的方法是改變流動(dòng)相組成或柱填料顆粒的鍵合相功能。分辨率方程清楚地確定了影響峰分辨率的三個(gè)主要因素:其中Rs是兩個(gè)靠近洗脫峰的分辨率(間...
選擇保護(hù)柱的原則是:在滿足分離分析要求的前提條件下,盡可能的選擇較短的保護(hù)柱,盡可能選擇對(duì)分離樣品保留弱的填料。大多數(shù)色譜工作者是根據(jù)分析柱的填料來(lái)選擇保護(hù)柱的填料,正常情況下可以選擇與分析柱一樣的色譜填料。但是,根據(jù)實(shí)際的分析工作,可不必與分析色譜柱的填料全然匹配。色譜柱通常在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮樣品是否清潔,對(duì)于大部分分析工作來(lái)說(shuō),一支25px長(zhǎng)的保護(hù)柱便能夠提供充分的保護(hù)作用。但是,如果樣品較臟,或工作中發(fā)現(xiàn)經(jīng)常要更換25px的保護(hù)柱,那么就應(yīng)該選用50px或75p...
柱色譜法是一種常用于分離復(fù)雜混合物中分子的方法。與平面色譜不同,在柱色譜中固定相或樹脂被填充到色譜柱中。然后流動(dòng)相通過(guò)填充的固定相以實(shí)現(xiàn)分離。這種分離的目的可以是分析性的或制備性的。柱層析在玻璃、塑料或金屬柱內(nèi)的填充三維固定相上進(jìn)行,可用于制備和分析目的。柱層析技術(shù)包含基于不同固相和液相化學(xué)和柱配置的廣泛應(yīng)用,能夠?qū)崿F(xiàn)精確分析以及分離難以或不可能通過(guò)其他方法分離的復(fù)雜混合物。有許多系統(tǒng)可用于液相色譜,系統(tǒng)的選擇取決于所需分離的復(fù)雜性。流動(dòng)相可以通過(guò)重力流、使用離心力或使用基于...
舉個(gè)例子問(wèn)您一個(gè)問(wèn)題,您有沒有試過(guò)在濾紙條上放一小點(diǎn)黑色墨水,然后浸在溶劑溶液中的測(cè)試?您沒看到墨水是如何開始在紙條上移動(dòng)并溶解成不同顏色的嗎?其實(shí)您完成了這個(gè)小實(shí)驗(yàn),您就已經(jīng)記住了什么是色譜。如果您從事化學(xué)工作或研發(fā)類實(shí)驗(yàn)分析等相關(guān)領(lǐng)域,您可能遇到過(guò)液相色譜。液相色譜法是一種分析技術(shù),可將液體或混合物樣品分離成單獨(dú)的純組分。液相色譜技術(shù)是準(zhǔn)確的,并且由于樣品通過(guò)設(shè)備暴露于一組物理或化學(xué)反應(yīng)而發(fā)生,樣品經(jīng)過(guò)流動(dòng)相和固定相以達(dá)到最終結(jié)果一、液相色譜過(guò)程涉及哪些步驟,是如何完成的...
液相色譜保護(hù)柱的性能關(guān)系很多因素,基質(zhì)或者說(shuō)擔(dān)體、載體的化學(xué)性質(zhì)、鍵合相(固定液)的化學(xué)性質(zhì)、填料形狀大小粒度分布、碳量和鍵合度等。色譜柱填料可以由基質(zhì)直接構(gòu)成,如硅膠、氧化鋁、高交聯(lián)度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等;也可以在這些基質(zhì)的基礎(chǔ)上涂布或化學(xué)鍵合固定液來(lái)構(gòu)成,如:經(jīng)典的各種ODS柱、氨基柱、氰基柱等。主要基質(zhì)的特點(diǎn):a.硅膠硅膠是陶瓷性質(zhì)的無(wú)機(jī)物基質(zhì),剛性大,不易變形?;瘜W(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定,但對(duì)于水溶液尤其堿性水溶液仍然是不穩(wěn)定的,即使表面經(jīng)過(guò)良好的化學(xué)鍵合,覆蓋了...
快看過(guò)來(lái)!你知道產(chǎn)生鬼峰的原因都有哪近年來(lái)隨著高效液相色譜儀的檢測(cè)器靈敏度和色譜柱峰容量的提高,可以在極低濃度下進(jìn)行檢測(cè),但鬼峰問(wèn)題卻成為了人們關(guān)注的焦點(diǎn)。恒譜生今天就跟大家聊聊鬼峰產(chǎn)生原因和解決措施吧!一、什么是鬼峰:如果化合物出現(xiàn)的時(shí)間少于預(yù)期的保留時(shí)間,則稱為鬼峰”。這將顯示為與注入同一色譜圖的化合物具有不同保留時(shí)間的峰。色譜中的鬼峰是在小于預(yù)期保留時(shí)間的間隔內(nèi)出現(xiàn)的不需要的峰。這些峰通常是由其他化合物或代謝物與溶劑和固定相的相互作用引|起的,這會(huì)導(dǎo)致分離度降低,使評(píng)估...