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影響hplc色譜柱壽命的幾個(gè)因素主要包含:流動(dòng)相因素,樣品因素與其他因素。色譜柱使用過(guò)程中應(yīng)該注意這些因素,才能有效增加使用壽命。一、流動(dòng)相因素1、流動(dòng)相pH不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無(wú)定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg?L-1,且在pH1~9的范圍內(nèi)溶解的硅膠量幾乎是常量,考慮到溶解速度的影響,對(duì)于硅膠基質(zhì)的填料,其所能承受的流動(dòng)相pH范圍約為1~8。鍵合相硅膠填料則由于鍵合層的屏蔽作用,使填料對(duì)流動(dòng)相的適應(yīng)范圍大大增加,如現(xiàn)在廣泛使用的反相色譜填料C...
液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(tuán)(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱,GPC柱,聚合物填料柱等。液相保護(hù)柱在使用中最常見(jiàn)的問(wèn)題:就是柱壓升高,如果柱壓是在長(zhǎng)時(shí)間使用過(guò)程中緩慢增加,屬于正?,F(xiàn)象。但柱壓在使用過(guò)程中突然升高(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外),可能的原因有如下幾點(diǎn)...
.氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。正相使用新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積,最后換成流動(dòng)相。正相使用時(shí),不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動(dòng)相要*脫氣,并不得含有羰基化合物和過(guò)氧化物(質(zhì)...
高效液相色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性,延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。色譜柱使用時(shí)間后就會(huì)出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時(shí)間改變等變化,如不采取措施,將會(huì)縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。因此,有必要加強(qiáng)和規(guī)范色譜柱的管理,從而延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。本文從影響色譜柱使用壽命的幾個(gè)因素出發(fā),從管理的角度,探討色譜柱的維護(hù)與保養(yǎng)。影響高效液相色譜柱使用壽命的因素1.流動(dòng)相在以水溶液為...
反相色譜柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟(jì)和有效的保護(hù),延長(zhǎng)了色譜柱的壽命,分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時(shí)間的增加,高效液相色譜柱分離效能下降,柱壓增高,其原因主要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量填料被污染引起的,而色譜柱整個(gè)柱床并未被破壞,使用保護(hù)柱,相當(dāng)于在色譜柱前增加了一段額外的填料,起到了保護(hù)整個(gè)色譜柱的作用。反相色譜柱特點(diǎn):采用高度可控的單分子層形成和封尾技術(shù);高的柱間重現(xiàn)性;高的選擇性和分離效率;適合分離酸性、中性和堿性化合物,以及許多藥物和多肽等。反相色譜柱在使用緩沖液的過(guò)程中還要...
HPLC色譜儀器可以是一組單獨(dú)的模塊或元件,但也可以設(shè)計(jì)為單個(gè)裝置。模塊概念在單個(gè)組件失效的情況下更加靈活;此外,系統(tǒng)各個(gè)零件不必來(lái)自同一制造商。如果您不喜歡自己進(jìn)行小修,您會(huì)更喜歡緊湊型儀器。然而,這并不需要比模塊化套件更少的工作臺(tái)空間。一臺(tái)HPLC儀器至少具有溶劑罐、帶篩板的傳輸線、高壓泵、進(jìn)樣裝置、色譜柱、檢測(cè)器組成部分。一、高效液相色譜儀HPLC儀器通常由九個(gè)基本組件組成:流動(dòng)相/溶劑容器、溶劑輸送系統(tǒng)、樣品引入裝置、色譜柱、柱后裝置、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)收集和輸出系統(tǒng)、檢測(cè)...