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目前已知的化合物中,80%都需要用高效液相色譜法來(lái)分析,它以快速、高效、靈敏度好、分離效率高和適用范圍廣等特點(diǎn)在各領(lǐng)域成分測(cè)定中得到肯定與使用,藥典將液相色譜法作為許多成分測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)分析方法。高效液相色譜法是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的,HPLC的不同之處在于,它需要更加粒徑小的色譜硅膠填料,更高壓力的泵、柱效更好的高效色譜柱。粒徑更加小的色譜填料意味著能有更高的柱效,但是這樣也帶來(lái)液相系統(tǒng)內(nèi)部壓力增大的問(wèn)題。系統(tǒng)內(nèi)部壓力高,對(duì)泵、色譜柱、保護(hù)柱、管路都是一個(gè)考驗(yàn)。uH...
液相色譜柱在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用,是色譜分析的核心部件。正確使用和維護(hù)色譜柱尤為重要,使用不當(dāng)會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。以下從幾個(gè)方面簡(jiǎn)答介紹液相色譜柱在使用過(guò)程中應(yīng)當(dāng)著重注意的問(wèn)題。一、避免壓力和溫度的急劇變化溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,以保持色譜柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。二、避免直接改變?nèi)軇┑慕M成在需要改變檢測(cè)樣品溶液組成是,應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,...
流動(dòng)相被稱為HPLC系統(tǒng)的生命線,它起著至關(guān)重要作用:將樣品輸送通過(guò)分離柱,然后輸送至檢測(cè)器以鑒定分離出的成分。流動(dòng)相通常很少是單一的溶劑,它是水與有機(jī)溶劑相組合制成,比如水與極性溶劑的緩沖液或有機(jī)溶劑按所需比例混合組成。常用的兩種操作模式是:等度洗脫—在等度模式下,流動(dòng)相的組成在整個(gè)分析過(guò)程中保持不變。即混合物中溶劑的比例是預(yù)先確定的,并且在分析過(guò)程中只使用這一種流動(dòng)相溶劑。梯度洗脫—通過(guò)軟件以預(yù)定模式通過(guò)分析運(yùn)行改變組成,運(yùn)行結(jié)束時(shí)溶劑的比例與初始比例不同。在進(jìn)行色譜分析...
高效液相色譜廣泛應(yīng)用于各種領(lǐng)域的樣品分析測(cè)定,其中C18反相色譜柱可以分析絕大多數(shù)的化合物,是一款常用且入門的色譜柱。柱子在使用中,日常的維護(hù)和活化該如何去做呢?恒譜生帶大家了解!uHPLCs恒譜生建議在使用一款新的液相色譜柱前,最好進(jìn)行柱性能試驗(yàn),記錄試驗(yàn)條件和結(jié)果,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。柱效對(duì)于色譜柱是一個(gè)非常重要的考慮因素,想要分析結(jié)果好就一定要好好保養(yǎng)色譜柱,維護(hù)它的高柱效。測(cè)試時(shí)要注意:你的測(cè)試環(huán)境與條件應(yīng)該按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,這樣測(cè)得的結(jié)果才有...
c18色譜柱的柱效能是評(píng)價(jià)色譜性能的一項(xiàng)重要指標(biāo),混合物能否在色譜柱中得到分離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關(guān)。高效液相色譜柱的正確使用包含:加裝保護(hù)柱,過(guò)濾流動(dòng)相和樣品,凈化樣品,避免過(guò)高的柱壓,注意溫度和酸堿度,正確及時(shí)的沖洗等。1、加裝保護(hù)柱保護(hù)柱的作用是過(guò)濾掉來(lái)自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾...
什么是固定相?簡(jiǎn)而言之就是在色譜分離中固定不動(dòng)、對(duì)樣品產(chǎn)生保留的一相。固定相的選擇對(duì)樣品的分離起著重要作用,有時(shí)甚至是決定性的作用。不同類型的色譜采用不同的固定相,如氣-固色譜的固定相為各種具有吸附活性的固體吸附劑;氣-液色譜的固定相是載體表面涂漬的固定液,液相色譜中的固定相為各種鍵合型的硅膠小球,離子交換色譜中的固定相為各種離子交換劑,排阻色譜中的固定相為各種不同類型的凝膠等等。以下,恒譜生將簡(jiǎn)單帶大家了解一下固定相的不同類型以及它們有什么特點(diǎn)。正相色譜正相色譜柱填料極性強(qiáng)...