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恒譜生建議各位色譜操作者在進(jìn)行液相色譜分析前,關(guān)注樣品過(guò)濾的重要性,這是為什么呢?主要是為防止蛋白質(zhì)等雜質(zhì)沉積在色譜柱上,上柱前需對(duì)生物樣品進(jìn)行去蛋白的預(yù)處理。這樣可以延長(zhǎng)色譜柱壽命并減少維護(hù)成本,從而有助于提高實(shí)驗(yàn)室通量。脫蛋白對(duì)于分析生物液體(例如血漿,血清,尿液和腦脊髓液)中的抗生素,殘留農(nóng)藥含量等也起著非常重要的影響。并且如果不將沉淀的蛋白質(zhì)從樣品中去除,會(huì)導(dǎo)致色譜柱性能下降,最終影響色譜分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。生物樣品中去除蛋白質(zhì)的處理方法有3種:利用蛋白質(zhì)脫水沉淀。采用...
色譜柱填料技術(shù)呈現(xiàn)二大趨勢(shì)。一個(gè)趨勢(shì)是快速液相,利用亞2?m小粒徑硅膠、核殼型硅膠;第二大趨勢(shì)是越來(lái)越豐富的選擇性。填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù),即柱效和背壓。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3μm的填料應(yīng)用,在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是位一的因素。如果固定相選擇是真確,但是分離度不夠,那么選擇更小粒度的填料是很用有的,3μm填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而,3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時(shí),柱效提高意味...
色譜工作者都知道,在液相色譜儀或者高效液相色譜儀工作時(shí),不能有氣泡進(jìn)入系統(tǒng),否則會(huì)出現(xiàn)諸如雜峰、壓力波動(dòng)不穩(wěn)定和基線噪音等問(wèn)題。通常對(duì)氣泡這種問(wèn)題,要預(yù)先進(jìn)行處理,如果等到氣泡進(jìn)入系統(tǒng)想要處理,可就不那么容易了。對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行提前過(guò)濾和脫氣處理,這是一個(gè)比較好的解決辦法。大家可能會(huì)想,我選擇實(shí)驗(yàn)分析的HPLC級(jí)溶劑還要過(guò)濾嘛?答案是:還是要過(guò)濾的!流動(dòng)相過(guò)濾可以選擇溶劑過(guò)濾器,過(guò)濾掉里面的雜質(zhì)和避免空氣進(jìn)入系統(tǒng)里。恒譜生溶劑過(guò)濾頭可有效濾除流動(dòng)相中的固體顆粒雜質(zhì),不會(huì)產(chǎn)生氣泡,...
無(wú)論氣相色譜還是液相色譜,我們最終用來(lái)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的都是色譜峰。zui理想的色譜峰長(zhǎng)什么樣呢?它長(zhǎng)得如下圖所示,符合高斯分布的兩邊對(duì)稱的色譜峰是理想的峰形。而做色譜分析實(shí)驗(yàn)就好像買(mǎi)彩piao,不是每次都有理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)的。更多時(shí)候,總是會(huì)出現(xiàn)一些“奇奇怪怪”的峰型,比如峰拖尾、峰前延、倒峰、寬峰等。為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的情況呢?要針對(duì)不同的峰型來(lái)具體分析。比如峰拖尾,這是比較常見(jiàn)的峰型,可能有以下幾種原因:色譜柱如果受到污染,會(huì)導(dǎo)致柱效下降,影響分析效果。如果等到發(fā)現(xiàn)柱頭污染...
如果說(shuō)色譜柱在液相色譜分析中的作用好比人的“大腦”,那么色譜填料就好比我們?nèi)说摹靶呐K”。液相分析結(jié)果好壞和準(zhǔn)確性,與填料有著非常重要的聯(lián)系。液相色譜填料的種類有很多,主要分為聚合物填料、硅膠基質(zhì)填料和其它無(wú)機(jī)填料。其中,硅膠基質(zhì)的填料被廣泛應(yīng)用于各種液相色譜分析中。硅膠填料有什么好處呢?硅膠基質(zhì)純度高,pH值通常在2-8之間,有些特殊的硅膠鍵合相的ph值可以穩(wěn)定在pH1.5-10。同時(shí)還具有比較高的比表面積,高比表面積具有較強(qiáng)的保留能力、柱容量和分離度;機(jī)械強(qiáng)度大,可以保證在...
一種新的研究方法的誕生,大多是為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足。反相液相色譜法能解決多種分析應(yīng)用問(wèn)題,但對(duì)極性和親水性化合物很少或無(wú)法保留保留。如果使用正相液相色譜法,用己脘或環(huán)已脘來(lái)分析這些物質(zhì)也存在一些局限性,很多極性和親水化合物往往很難溶解,從而限制了NPLC的應(yīng)用范圍。在此基礎(chǔ)上,誕生了一種新的解決辦法—親水作用液相色譜(HILIC)。在HILIC色譜柱上,物質(zhì)的洗脫順序與RPLC恰恰相反,在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質(zhì),在通常的實(shí)驗(yàn)條件下,它們?cè)贖ILIC柱上有較強(qiáng)...