聯(lián)系電話 13632754400
當前位置:首頁 > 技術文章
制備柱具有各種尺寸,可以實現(xiàn)高分辨率分析和快速的分析。在制備色譜中,達到高純度、高回收率和高通量的分離十分重要。制備柱主要應用在植物化學、藥物合成、生物化學等領域的產(chǎn)品的提取及純化工作中。不同的工作領域中組分的制備和純化量的差異較大。在生物技術領域中,酶的分離是μg級;在天然產(chǎn)物化學和合成化學領域中,為應對未知成分定性鑒別、結構測定、生物活性測試等要求,需要純化若干mg級的高純物;在藥品和醫(yī)藥學測試中,需要g級的標準品和對照品;在工業(yè)級提純中,目標產(chǎn)物工業(yè)化生產(chǎn)往往需要kg級...
1.高壓勻漿法裝填液相色譜柱將填料懸浮在適宜的勻漿液中制成勻漿,在其尚未沉降之前,很快以高壓泵將其以很高的流速壓進柱中,便可制備出填充均勻的柱子。這是常見的分析和制備色譜柱的裝填方法。2.濕法裝填對于柱、特別是現(xiàn)在流行的以3-10μm細柱徑填料填裝的分析柱,則必須使用濕法,即勻漿法裝柱。因為,隨著粒徑的縮小,因靜電作用和表面能的加大,粒子間傾向于聚集和“粘結”,若以干法填裝,它們會粘附在連接管及柱壁上,也會因強烈的靜電作用彼此排斥,因而難以填裝出均勻而緊密的柱床。這樣,必須改...
C18色譜柱因鍵合方式的不同、粒徑的不同、長度的不同,內(nèi)徑的差異等多方面因素,呈現(xiàn)出不同選擇性。柱填料的選擇關系到色譜分離的可能性,而柱規(guī)格的選擇直接影響分析速度、分離能力、檢測能力及每次分析的溶劑消耗等。柱規(guī)格包括兩方面:柱內(nèi)徑和柱長度。柱內(nèi)徑,分析型一般為2~6mm,制備型20mm,大者可達80mm;柱長度,分析型5~30cm,制備型15~50cm。一般來說,柱內(nèi)徑不影響分離度與分析時間的關系。今天,柱技術已發(fā)展到不同柱內(nèi)徑的柱子能夠具有相同的性能。不同內(nèi)徑的柱子又各具特...
日常分離分析工作中,c18液相色譜柱的使用和維護十分重要,液相色譜柱使用是否得當,直接影響柱子的壽命,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。液相色譜柱的正確使用:(1)柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。(2)如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,這樣有助于延長柱子的壽命。(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的...
1)在pH值正常范圍內(nèi)(2~8)可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱,具有峰形好,重現(xiàn)性高和壽命長的特點,選用較短的柱子可以提高分離效率,選用較長的柱子可以增加保留,選用小顆粒度的填料可以提高分離度,對分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。2)分離極性大的組分(流動相水相過大)采用AQ類似的色譜柱。3)分離生物堿類的化合物選用經(jīng)過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。4)極端酸性條件下(pH小于2)選用ZorbaxStableBondC18類色譜柱或者寬pH值色譜柱。5)低端...
影響C18色譜柱壽命的幾個因素主要包含:流動相因素,樣品因素與其他因素。色譜柱使用過程中應該注意這些因素,才能有效增加使用壽命。一、流動相因素1、流動相pH不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg/L-1,且在pH1~9的范圍內(nèi)溶解的硅膠量幾乎是常量,考慮到溶解速度的影響,對于硅膠基質(zhì)的填料,其所能承受的流動相pH范圍約為1~8。鍵合相硅膠填料則由于鍵合層的屏蔽作用,使填料對流動相的適應范圍大大增加,如現(xiàn)在廣泛使用的反相色譜填料C1...